目前,要想知道河流、湖泊、水庫等地表水是否富營養化,可以通過檢測水中磷、氮等營養物質的含量,或者觀察水中藻類的繁殖情況來判斷。但是我們今天要說的是通過檢測水中的葉綠素a來判斷水體是否富營養化。我們都知道水體富營養化的主要表現是水中藻類的增殖,而所有的藻類都含有葉綠素a,因此可以通過水中葉綠素a的含量來判斷水中藻類的多寡。該方法的原理是用濾膜過濾一定量的樣品以截留藻類,將藻類細胞研磨破碎,用丙酮溶液提取葉綠素,分別測定提取液在750nm、664nm、647nm和630nm波長處的吸光度離心。該公式計算水中葉綠素 a 的濃度。 從河流中采集葉綠素 a 水樣檢測所需的試劑和儀器 實驗試劑 1、丙酮。 2、碳酸鎂。 3、丙酮溶液:9+1。 將100ml 實驗用水加入900ml丙酮中。 4、碳酸鎂懸浮液。 稱取1.0g碳酸鎂,加入100ml實驗用水,攪拌成懸浮液(使用前搖勻)。 5、玻璃纖維濾膜:直徑47mm,孔徑0.45um-0.7um。 實驗設備 1、取樣瓶:1L或500ml棕色帶磨口玻璃瓶。 2、過濾裝置:配有真空泵和玻璃砂芯過濾裝置。 3、研磨裝置:玻璃研缽或其他組織研磨器。 4、離心機:相對離心力可達1000×g(轉速3000r/min~4000r/min)。 5、玻璃刻度離心管:15ml,旋蓋材料,不與丙酮反應。 6、可見分光光度計:配10mm石英比色皿。 7、針濾器:0.45um聚四氟乙烯有機相針濾器。 8、通用實驗室儀器和設備。 水樣采集與保存 水樣采集一般采用有機玻璃集水器或其他合適的采樣器采集水面對于水深0.5m的水樣,可根據需要在湖泊、水庫中分層取樣或混合取樣,取樣體積為1L或500ml。如果水樣中含有沉淀物(如沉淀物等),將水樣搖勻后倒入2L量筒中,避光放置30分鐘,在水面以下5cm處取水樣,轉移至取樣瓶中。每升水樣加入1ml碳酸鎂懸浮液,以防止酸化引起色素溶解。水樣采集后應在0℃-4℃避光保存和運輸,并在24小時內運至檢測實驗室過濾(如水樣不能在24小時內送至檢測實驗室,則應就地過濾,濾膜避光保存(冷凍運輸),水樣濾膜-20℃避光保存,14天內分析完成。 準備水樣 在過濾器單元上安裝玻璃纖維過濾器。根據水體營養狀況確定采樣量。具體以過濾水樣的體積為準。用量筒量取一定體積的混合水樣,過濾,最后用少量蒸餾水沖洗濾壁。過濾時,負壓不應超過50kPa。當水樣剛完全通過濾膜時,吸濾應完成。用鑷子取出濾膜,將有水樣的一面對折,用濾紙擦干濾膜。
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